Информации

2.8: Микробиолошка безбедност на храна - биологија

2.8: Микробиолошка безбедност на храна - биологија


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Тестирање за бактериска контаминација на храната

Бактериите се неверојатно разновидни и во изобилство се наоѓаат во поголемиот дел од природниот свет. Патогени (кои предизвикуваат штета) и потенцијално патогени бактерии може да се најдат на неочекувани места, како што се храната што ја јадеме, водата што ја пиеме или користиме за рекреација, во почвата, на површините во вашиот дом и на други места.

За наша несреќа, работите што ги јадеме и пиеме се прилично вообичаени средства за пренос на болести. И, бидејќи храната и пијалоците минуваат низ нашиот дигестивен тракт, најчестите симптоми на болест што се пренесува преку храна се абдоминална непријатност или болка, гадење, дијареа и/или повраќање. Болестите на гастроинтестиналниот тракт предизвикани од микробите кои се пренесуваат преку храната се движат по сериозност од благи до крајно исцрпувачки, дури и фатални. Биолошките агенси одговорни за овој тип на болест може да бидат вируси, бактерии, габи, протозои или хелминти.

За да се заштити јавноста од болести, производителите и дистрибутерите на храната што се консумира во Соединетите Држави мора да докажат дека нивната храна е без патогени пред да биде понудена на продажба. Регулаторните агенции на локално, државно и федерално ниво (како што се Одделот за земјоделство и Администрацијата за храна и лекови) бараат рутинско бактериолошко тестирање за да се заштити јавноста од заболување што се пренесува преку храна. Иако многу видови на микроби може да предизвикаат болести предизвикани од храна, ЦДЦ и ФДА во моментов ги земаат предвид бактериите Bacillus cereus, Campylobacter jejuni, Клостридиум spp., патогени соеви на Ешерихија коли, листеријамоноцитогени, Салмонела spp., Шигела spp., Staphylococcus aureus, Вибрио spp., и Јерсинија spp.; паразитите Криптоспоридиум и Циклоспора; и Norwalk вирусот (норовирус) (http://www.cdc.gov/foodnet/index.html) да биде најчестиот и најзагрижувачкиот во САД.

Иако постојат достапни „брзи“ методи за откривање на бактериски загадувачи во храната кои се потпираат на тестирање на ДНК и антитела, покритието на примероците на диференцијални и селективни подлоги за култура е испробан и вистинит метод. Недостаток е што методите на култура одземаат повеќе време, но предностите вклучуваат едноставност на тестовите и повисоко ниво на специфичност и чувствителност.

Релативно малиот број на бактерии присутни во примерок од храна ја ограничува чувствителноста на сите различни видови тестови достапни за оценување на безбедноста на храната, вклучително и оние базирани на култура. Прелиминарен чекор наречен култура на збогатување може да се користи за да се засили бројот на бактериски патогени, со претходно инкубирање на примерокот од храната во неселективен медиум кој промовира раст на било која бактерија што може да се наоѓа во примерокот.

Многу стандардни методи вклучуваат култура на збогатување во две фази. Првиот чекор, или претходно збогатување, вклучува додавање на одредена количина (одредена по тежина, обично 10-25 грама) од храната што треба да се тестира во голем волумен (100-250 ml) на неселективен медиум за супа. По период на инкубација од 18-24 часа на 37°C, мал примерок од културата на збогатување се пренесува на еден или повеќе типови на селективни медиуми дизајнирани да го инхибираат растот на конкурентните микроби, додека дозволувајќи му на целниот патоген да се размножува. Многу такви формулации се исто така диференцијални, бидејќи растот на бактериската цел ќе предизвика карактеристична хемиска промена во изгледот на медиумот, со што ќе се „диференцира“ патогенот од другите можни загадувачи, како што се расипувачките организми, кои исто така може да се наоѓаат во храната. .

Ќе спроведеме сопствено истражување за безбедноста на храната користејќи модифицирана и намалена адаптација на стандардните лабораториски методи, почнувајќи со култура на претходно збогатување на примероци од храна, проследена со обложена на неколку видови селективни и диференцијални медиуми. Нашето определување за контаминација на храната ќе се заснова на (а) раст на бактерии на селективна средина и (б) набљудување на специфична биохемиска реакција (обично промена на бојата) карактеристична за одреден тип на патоген. Забележете дека овие методи се засноваат на бактериски фенотипови (особини), а повеќе од еден вид бактерии може да ги имаат истите селективни/диференцијални особини. Затоа, конечната идентификација на бактерија изолирана од храна бара дополнително тестирање.

Достапни се бројни медиумски формулации кои овозможуваат изолација и идентификација на патогени бактерии во храната. Користејќи ги медиумите опишани во Табела 1, ќе ја тестираме храната за контаминација со EHEC (ентерохеморагичен Ешерихија коли) и други соеви на E. coli, S. aureus, B. cereus, салмонела, и Шигела.

Табела 1
СредноСелективен агент(и)Диференцијални агентиОткривање
MacConkey агар

(МЕК)

Жолчните соли и кристално виолетовата боја го инхибираат растот на повеќето грам-позитивни, неентерични бактерии.Индикатор за лактоза и pH вредностГрам негативните ентерични бацили ќе растат; Ешерихија коли ќе произведе розови колонии, Салмонела и Шигела spp. не ферментирајте лактоза и колониите се безбојни.
Сорбитол MacConkey агар

(SMAC)

Жолчните соли и кристално виолетовата го инхибираат растот на повеќето грам-позитивни, неентерични бактерии.Индикатор за сорбитол и pH вредностГрам негативните ентерични бацили ќе растат; Ешерихија коли 0157: H7 не ферментира сорбитол и колониите се безбојни
Манитол сол агар

(МСА

7,5% натриум хлорид го инхибира растот на повеќето грам-негативни бактерииИндикатор за манитол и pH вредностРастеат бактерии толерантни за сол; S. aureus ферментира манитол и колониите се жолти; B. cereus не ферментира манитол и колониите се длабоко црвени.

Пред-збогатување за промовирање на бактериски раст

Забелешка: ова ќе бара време покрај вашиот редовен лабораториски период за да се заврши. Бидејќи и присуството и видот на бактерии кои може да се наоѓаат во храната се непознати, практиките за задржување на BSL2 треба да се користат во текот на целата процедура.

Примероците од храната ќе бидат достапни во лабораторијата до една недела пред закажаниот лабораториски период.

Префрлете 5 ml од Tryptic Soy Broth во пластична епрувета за култура за еднократна употреба. Треба да изберете еден примерок од храна за тестирање. Подгответе култура за збогатување на избраната храна, со префрлање на мала количина од храната во супата во епруветата за култура, користејќи асептична техника. Ставете капа на цевката, целосно измешајте ја содржината и ставете во инкубатор на 37°C.

Најмалку 18 часа по започнувањето на културата на збогатување (се претпочита еден ден по започнувањето на културата на збогатување), и не подоцна од денот пред закажаниот период за ова истражување, вратете се во лабораторија и користете јамка за инокулација за субкултура на примероците од културата на збогатување на секој од трите типа на селективни и диференцијални медиуми опишани во Табела 1. Користете го методот на плочка за сите плочи, така што ќе се формираат изолирани колонии. Соодветно отстранете ја културата на збогатување како потенцијална биоопасност.

Вратете ги плочите со ленти во инкубаторот за набљудување и понатамошно истражување во текот на лабораторискиот период.

Тестиран примерок од храна _________________________________________________________________

Варен или суров? ________________________________________________________________

Како се чуваше оваа храна пред тестирањето? _____________________________________

СредноРаст на средно? (да или не)Изглед на колонии/медиум ако настанал раст
MacConkey агар (MAC)
Сорбитол MacConkey агар (SMAC)
Манитол солен агар (MSA)

За секоја од селективните и диференцијалните медиуми на кои се забележани бактериски колонии, наведете што покажува изгледот на колониите во однос на можниот тип(и) на бактерии присутни во примерокот од храната.

СредноНабљудувања кои укажуваат на контаминација на примерокот на храна со потенцијални патогени од храната
MacConkey агар (MAC)
Сорбитол MacConkey агар (SMAC)
Манитол солен агар (MSA)

Растот и појавата на колониите на селективни и диференцијални медиуми е показател за присуството на специфични бактериски патогени, но овие резултати мора да се потврдат пред да се пријави дека храната е контаминирана и дека голтањето може да иницира болест што се пренесува преку храна. Затоа, направете дополнителни тестови за да потврдите дека колониите забележани на селективните медиуми се потенцијално патогени бактерии. Овие тестови вклучуваат:

Грам боење на репрезентативни колонии (сите)

Коагулаза тест за да се потврди Staphylococcus aureus (S. aureus е коагулаза +)

Колонијална морфологија и боење со ендоспор да се потврди Bacillus cereus

TSI тест за да се потврди E. coli, салмонела, и Шигела

Очекувани и експериментални резултати

За секоја бактерија, наведете го ОЧЕКУВАНИОТ исход од дамките од Грам и ендоспор и TSI тестовите кои би го потврдиле идентитетот на потенцијалниот патоген кој се пренесува преку храна.

Очекувани реакции на дамки од Грам:

Ешерихија коли ______________________ Салмонела spp. _____________________

S. aureus ___________________ Шигела spp. ________________________

B. cereus ___________________

Очекувани реакции на дамки од ендоспор:

B. cereus ________________________________________

Очекувани TSI реакции:

Ешерихија коли ________________ Salmonella spp. _______________ Шигела spp. _______________

За секој тип на колонија пронајден дека расте на различни типови на селективни и диференцијални медиуми, направете ги соодветните потврдни (или индикаторски) тестови и запишете ги тие резултати во табелата со резултати.

Резултати од потврдни тестови

Потенцијален патогенСе најде на кој медиум?Дополнителни тестовиИсход од тест(и)Присутно во примерок од храна?
Ешерихија коли
Ешерихија коли 0157: H7
S. aureus
B. cereus
Салмонела spp.
Шигела spp.

Откако ќе дознаете дали патогените за кои ги тестиравме во лабораторија се присутни во примерокот од храната што ја тестиравте, споредете ги вашите резултати со оние на другите во вашата лабораторија кои тестирале други видови храна.

Приближно колку од примероците на храна што беа тестирани од вашата лабораториска група беа контаминирани со една или повеќе од овие бактерии? Наведете ја храната со загадувачи подолу:

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

Размислете за значењето на исходот од оваа истрага и напишете ги вашите размислувања подолу. Пред да заврши часот, може да биде побарано да го споделите вашето размислување како дел од поголема дискусија за тоа што значи да се најдат бактерии (патогени или други) во храната што може да ја јадете.

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________


Погледнете го видеото: Ферментирана храна. Индустриска микробиологија (Јуни 2022).


Коментари:

  1. Ayub

    Потврдувам.Така се случува. Ајде да разговараме за ова прашање. Овде или во премиерот.

  2. Braleah

    Доброволно прифаќам. In my opinion it is actual, I will take part in discussion.

  3. Vujind

    I can recommend a visit to the site, where there are many articles on the topic that interests you.

  4. Kajisar

    Вие не сте во право. Јас предлагам да разговара. Пишувај ми во попладне.

  5. Ruffe

    Response intelligibility

  6. Mano

    Where I can find it?



Напишете порака